目的:探究过氧化物酶体增生激活受体γ协同刺激因子1α (PGC-1α)和B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)在调控细胞周期中的相互关系.
创新点:首次证明在血清饥饿时PGC-1α负调控Bcl-2,并且认为Bcl-2可能通过招募PGC-1α降低细胞中的活性氧自由基(ROS)以调节细胞周期.
方法:用蛋白质印迹法(Western blotting)检测了接触抑制和血清饥饿处理的NIH3T3过表达Bcl-2的细胞中PGC-1α的表达,并且分别检测了用Bcl-2和PGC-1α的小干扰RNA(siRNA)降低U251细胞(内源性高表达Bcl-2和PGC-1α)中的Bcl-2和PGC-1α的表达,最后用免疫共沉淀(co-IP)检测了二者的关系.
结论:本实验中用两种细胞同步化的方法(接触抑制和血清饥饿)处理了Bcl-2过表达的NIH3T3细胞时发现PGC-1α高表达,用Bcl-2的siRNA处理了U251细胞时发现PGC-1α的表达降低,但是血清饥饿处理了U251后发现Bcl-2升高而PGC-1α降低,而且PGC-1α被siRNA降低后Bcl-2反而上升,最后用Bcl-2抗体免疫共沉淀了PGC-1α蛋白,这些结果说明在血清饥饿时PGC-1α负调控Bcl-2行使调节细胞周期的功能.

关键词组：过氧化物酶体增生激活受体γ协同刺激因子1α (PGC-1α);B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2);线粒体;活性氧自由基(ROS);细胞周期

目的:探讨线粒体内核转录因子(NF-κB)的表达与脂多糖(LPS)诱导损伤后神经细胞的凋亡之间的关系.
创新点:(1)LPS诱导后,线粒体中NF-κB的增加导致细胞凋亡;(2)腺嘌呤核苷酸转位酶1(ANT1)活性决定线粒体中NF-κB的水平.
方法:通过MTT和Hoechst 33342染色来测定药物对PC12细胞的作用;用电子显微镜和罗丹明123(rhodamine 123)检测线粒体的形态和功能;通过酶联免疫吸附测定(ELISA)测量ANT1、脂质过氧化物和抗过氧化物酶的活性;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测NF-κB的相对表达水平.
结论:(1)在LPS诱导的神经元细胞损伤后的细胞凋亡期间,NF-κB通过摄取ANT1在线粒体中被激活;(2)神经生长因子(NGF)不仅降低NF-κB活性,还降低ANT1活性,进而使得线粒体中NF-κB的表达水平下降,并抑制线粒体介导的细胞凋亡.

关键词组：核转录因子(NF-κB);线粒体;细胞凋亡;腺嘌呤核苷酸转位酶1(ANT1);脂多糖(LPS)

目的:评估血浆输注对脂多糖/D-半乳糖(LPS/D-GalN)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用,并探讨其作用机制.
创新点:在小鼠急性肝损伤模型中证明血浆输注对肝损伤的保护作用,且此作用与p53介导的肝细胞凋亡相关.
方法:将40只清洁型ICR雄性小鼠随机分为4组 (n=10每组):(1)对照组;(2)血浆(plamsa)组;(3)LPS/D-GalN组;(4)LPS/D-GalN+plamsa组.收集血清和肝组织样本,用天门冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂盒检测血清中AST和ALT水平;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肝组织中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达变化;肝组织进行苏木精-伊红染色法(HE)和网状纤维染色,显微镜下观察肝组织病理学变化;用免疫印迹法(WB)检测凋亡相关蛋白的变化.在腹腔注射LPS/D-GalN后 32小时内对小鼠进行存活分析.
结论:LPS/D-GalN能够显著诱导小鼠的急性肝损伤,包括增加血清中AST和ALT水平;中心小叶坏死和炎性细胞的组织病理学变化和炎症上调(TNF-α和IL-6).当血浆输注后,这些变化被缓解.结果显示,血浆输注显著降低小鼠死亡率,降低AST、ALT和炎症因子如TNF-α和IL-6的水平.Cleaved Caspase-3、BAX和p53的表达下调,Bcl-2上调,表明血浆可以减少LPS/D-GalN诱导的细胞凋亡.血浆输注对LPS/D-GalN诱导的急性肝损伤的保护机制与通过p53诱导的凋亡途径和炎症因子减少相关.

关键词组：肝损伤;血浆;炎症;凋亡

目的:探讨赤霉素对SlYABBY2b基因调控番茄心室形成过程中的作用,为进一步研究番茄畸形果发生机理提供了理论基础.
创新点:首次明确了SlYABBY2b基因与赤霉素的关系,且筛选出SlYABBY2b调控赤霉素合成的关键基因GA20ox1、GA3ox2、GA2ox1和GA2ox5.
方法:利用Gateway技术法构建SlYABBY2b基因超表达和沉默载体,并通过农杆菌介导转化法获得转基因植株.用酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测转基因植株中赤霉素的含量,用实时荧光定量分析(qRT-PCR)赤霉素突变体中SlYABBY2b基因表达水平和SlYABBY2b转基因植株中赤霉素相关基因的转录水平.
结论:本实验中赤霉素突变体中SlYABBY2b基因表达量显示,赤霉素短缺导致番茄植株体内SlYABBY2b基因的升高.ELISA实验结果显示,SlYABBY2b基因也能够反馈调控赤霉素的合成.qRT-PCR结果显示,SlYABBY2b基因抑制GA20ox1和GA3ox2基因的表达,促进GA2ox1和GA2ox5基因的表达.综上所述,研究结果明确了SlYABBY2b基因位于赤霉素信号转导的途径上,反馈调节赤霉素的合成,感受外源赤霉素的信号,从而进一步调控番茄心室的形成.

关键词组：SlYABBY2b基因;赤霉素;赤霉素突变体;子房心室;转基因植株;基因表达;番茄

目的:应用双向电泳及质谱技术分析PM_2.5对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)蛋白质组的影响,探讨PM_2.5引起心血管毒性的潜在机制.
创新点:多项流行病学调查表明,PM_2.5与人类心血管疾病有密切关系,而血管内皮细胞是血管的第一道防线.本项目应用蛋白质组技术研究PM_2.5对血管内皮细胞损伤的作用,并从DNA损伤的角度探讨了PM_2.5心血管毒性机制,具有较好的创新性.研究结果可为PM_2.5的危害分析提供基础数据,同时为PM_2.5的防治提供新的依据及思路.
方法:培养HUVEC细胞,分为正常组(正常培养的HUVEC细胞)、PM_2.5处理组(50、100 µg/ml PM_2.5处理HUVEC细胞24 h).双向电泳技术建立各组细胞蛋白质组图谱,质谱技术鉴定差异表达的蛋白质,流式细胞术分析细胞凋亡情况,酶联免疫吸附法(ELISA)检测DNA损伤产物8-OHdG的水平,荧光标记技术分析DNA双链断裂的形成,并用免疫印迹法(Western blotting)检测DNA损伤相关蛋白的表达.
结论:经PM_2.5处理HUVEC后,31个蛋白表达发生了显著性的变化(图2,表1),其中8个蛋白质参与了DNA的损伤与RNA的编缉,7个蛋白质与细胞凋亡有关(表2).进一步实验表明:PM_2.5能够促细胞凋亡(图5),提高DNA损伤产物8-OHdG的含量(图6),促进DNA双链断裂位点的形成(图7),调节损伤修复相关蛋白(Mer11A、Rad50和Rad51)的表达(图8),抑制超氧化物歧化酶(SOD)的活性,增加HUVEC细胞内活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)的水平(图9).综上所述,PM_2.5能够通过调节一系列蛋白的表达,加重HUVEC细胞氧化应激水平,增加DNA损伤,促进细胞凋亡,造成内皮细胞损伤,从而导致心脑血管事件的发生.

关键词组：PM_2.5;人脐静脉内皮细胞;蛋白质组;毒性机制

目的:比较研究棉酚旋光异构体从日粮向血浆中转移以及瘤胃微生物的降解作用.
创新点:从饲粮向血浆中吸收代谢以及瘤胃微生物降解角度揭示了棉酚旋光异构体在牛体内代谢差异,为棉酚毒理学评价、棉籽类产品在畜牧生产中合理应用提供科学依据.
方法:利用高效液相色谱法(HPLC)测定全棉籽、血浆及瘤胃发酵液中棉酚旋光异构体含量.
结论:三个调研牛场奶牛日粮右旋、左旋棉酚摄入量分别在5.6~8.5和3.8~5.9 g/(d·herd) 之间.血浆棉酚含量与日粮棉酚摄入量呈正相关,右旋、左旋棉酚浓度分别在0.31~0.48和0.39~0.59 µg/ml之间.奶牛摄入棉酚中右旋棉酚比率(58.8%~59.8%)高于左旋棉酚,血浆中左旋棉酚比率(54.6%~55.9%)高于右旋棉酚.体外静态培养试验发现:500和1000 µg/g组左旋棉酚的降解率在6小时后分别为67.4%和85.7%,12小时后降解率分别升高到83.6%和92.5%;同时,棉酚旋光异构体之间降解规律相似.结果表明:相比于右旋棉酚,左旋棉酚在奶牛体内吸收率更高,瘤胃微生物对棉酚旋光异构体的降解没有选择性.

关键词组：棉酚旋光异构体;代谢动力学;牛

目的:分析心脏死亡供体(DCD)肾移植中移植物功能延迟恢复(DGF)高风险受者应用米芙(EC-MPS)联合低剂量他克莫司治疗术后1年的有效性及安全性,指导临床用药.
创新点:对比DGF高风险受者术后发生DGF及正常恢复受者的免疫抑制剂药代动力学特征.
方法:将本中心进行肾移植的61例DGF高风险受者按照实际病情纳入DGF组及正常恢复组,均行米芙联合低剂量他克莫司免疫抑制治疗.对比两组免疫抑制剂血药浓度及预后各项指标.
结论:DGF组及正常恢复组间米芙及他克莫司剂量无显著差异.术后1周DGF组EC-MPS血药浓度曲线下面积小于30 (mg·h)/L的比率显著高于正常恢复组,同时他克莫司谷浓度显著低于正常恢复组,DGF组经活检证实的急排反应的发生率显著高于正常恢复组,术后1周的EC-MPS血药浓度曲线下面积低于30 (mg·h)/L的受者中经活检证实的急排反应的发生率显著高于其他受者.1年移植物存活率、移植物功能及常见不良反应在两组间未见明显差异.

关键词组：米芙(EC-MPS);他克莫司;移植物功能延迟恢复(DGF);心脏死亡供体(DCD);肾移植

目的:探讨体重指数对中国多囊卵巢综合征(PCOS)患者体外受精胚胎移植结局的影响.
创新点:本研究是一项多中心大样本研究,纳入了华东、华南两家生殖中心的患者;本研究根据中国体重指数(BMI)分界点进行分组,而非国际BMI分界点,得出的结论更加适合中国或者亚洲人群.
方法:此项回顾性研究纳入2010年4月到2017年5月分别在华东、华南两家生殖中心进行体外受精胚胎移植的患者共1074例.根据推荐的中国BMI分界点,患者被分成四组:低体重组(BMI<18.5 kg/m²),正常体重组(18.5 kg/m²≤BMI<24.0 kg/m²),超重组(24.0 kg/m²≤BMI<28.0 kg/m²)和肥胖组(BMI≥28.0 kg/m²).比较各组间的基本信息、体外受精情况和妊娠结局.
结论:高BMI对中国PCOS患者的体外受精胚胎移植 结局没有不利影响.因为本研究是回顾性研究及一些潜在的偏差,所以此结论可能存在一定的局限性.

关键词组：体重指数;体外受精胚胎移植;多囊卵巢综合征