目的:通过比较阿霉素(ADR)作用的视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)和正常ARPE-19间的差异表达基因和信号通路,探究ADR治疗玻璃体视网膜增殖性疾病的潜在机制.
创新点:首次运用基因芯片技术通过比较转录组学分析探究ADR促进ARPE-19细胞凋亡的机制.
方法:采用磺酰罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)比色法和碘化丙啶(PI)单染结合流式细胞术检测ADR对ARPE-19细胞的增殖抑制作用;通过基因芯片技术筛选ADR作用的ARPE-19 细胞(实验组)和正常ARPE-19细胞(对照组)间的差异表达基因和相关信号通路;用JC-1染色结合流式细胞术和Bcl2/Bax蛋白表达比率检测线粒体功能;通过检测γ-H2AX、p-CHK1、 p-CHK2等蛋白表达量分析DNA的损伤和修复.
结论:ADR通过启动DNA损伤反应,引起p53信号通路依赖的线粒体功能失调并激活caspase依赖的凋亡,最终导致ARPE-19细胞死亡.

关键词组：阿霉素;玻璃体视网膜增殖性疾病;视网膜色素上皮层;p53;凋亡

目的:骨关节炎是临床上的一种常见病和多发病.本研究尝试利用壳聚糖、透明质酸和硫酸软骨素为载体,制备一种携载生长分化因子5(GDF-5)质粒的纳米微球用于骨关节炎的基因治疗.
创新点:首次利用壳聚糖、透明质酸、硫酸软骨素三种原料制备可携载GDF-5质粒的三元纳米微球,并将其应用到骨关节炎的治疗中.
方法:在55 °C下,按不同比例混合壳聚糖、透明质酸钠、硫酸软骨素和GDF-5质粒,利用静电吸附原理制备携载GDF-5质粒的三元纳米微球.分别利用扫描电镜和激光粒度散射仪测试微球的形貌和粒径;利用凝胶电泳检测质粒与微球的结合情 况;利用CCK-8检测微球的细胞毒性.将携载GDF-5质粒的微球与软骨细胞共培养,并将脂质体和空载组作为对照组,在预定的时间点通过免疫荧光染色、免疫组化染色以及生化成分分析,观察微球对软骨细胞外基质分泌情况的影响.最后将该纳米微球注射到骨关节炎模型兔体内,通过大体观察、苏木精-伊红(H&E)染色、免疫荧光染色和免疫组化分析该微球对骨关节炎的作用.
结论:本研究成功地利用壳聚糖、透明质酸和硫酸软骨素为原料,制备出携载GDF-5质粒的纳米微球.其中GDF-5质粒可以有效地促进软骨细胞外基质的分泌,透明质酸和硫酸软骨素是临床上常见的治疗骨关节炎的药物.微球具有良好的理化性能,其细胞毒性小,转染效率高,在体内外均能有效地促进软骨细胞外基质的分泌,能够在一定程度上延缓骨关节炎的进展.该纳米微球将是一种极具希望的可应用于骨关节炎基因治疗的载体.

关键词组：骨关节炎;基因治疗;三元微球;GDF-5质粒

目的:探讨阿尔茨海默病(AD)和遗忘型轻度认知功能障碍(aMCI)在默认脑网络(DMN)、突显网络(SN)和执行控制网络(ECN)这三个脑网络中的半球间脑功能连接的差异性.
创新点:利用体素镜像同伦功能连接(VMHC)来观察AD和aMCI在多个脑网络基础上的半球间功能连接特点.
方法:该研究纳入了浙江省人民医院就诊的30例AD患者、14例aMCI患者和18例老年健康对照者,均给予静息态功能磁共振扫描,利用VMHC进行数据分析,联合简易智力状态检查量表(MMSE)和蒙特利尔认知评估量表(MOCA)进行相关分析.
结论:(1)位于三个脑网络的异常半球功能连接主要存在于AD组,可以作为AD诊断的一个敏感性指标;(2)VMHC值可以作为预测AD进展包括aMCI发展为AD的一个敏感性指标.

关键词组：体素镜像同伦功能连接;阿尔茨海默病;遗忘型轻度认知功能障碍;默认脑网络;突显网络;执行控制网络

目的:作为遗传研究中最常用的设计之一,基于家系数据的实验设计因其优势而得到了广泛认可,例如家系数据在人群分层和混合情况下表现出来的稳健性.在疾病风险预测中,研究者对如何基于家系遗传数据,寻找和分析遗传标记的作用非常感兴趣.本研究旨在开发一种新的统计方法,用于基于家系数据的遗传风险预测.
创新点:期望新方法能够捕捉小或中等边际效应的遗传因子,及其相互作用,与基于家族史或家系数据的现有风险预测方法相比,具有更高的预测准确性.
方法:在这项研究中,我们提出了集群化似然比(ELR)的新方法,Fam-ELR,用于家系数据的基因组疾病风险预测.Fam-ELR采用集群化的受试者工作特征曲线(ROC)方法来考虑家系样本内部的相关性,并使用计算有效的集群树进行变量选择和模型构建.
结论:通过模拟,Fam-ELR显示了其在各种疾病遗传模型和谱系结构中的稳健性,并且获得了比现有的两种基于家系数据的风险预测方法更好的性能.同时,在基于全基因组行为障碍家系数据集的实际应用中,Fam-ELR展示了其将潜在风险预测因子和其相互作用整合到模型中以提高准确性的能力,尤其是在全基因组水平上.通过比较现有方法,例如遗传风险评分方法等,Fam-ELR被证实具有将较小或中等边际效应的遗传变异及其相互作用纳入改进的风险预测模型的能力.因此,它是一种强有力且实用的方法,适用于基于家系数据的高维度遗传风险预测中,特别是对于病因未知或知之甚少的人类复杂疾病.

关键词组：家系数据研究;遗传风险预测;高维数据

目的:探讨Phyllanthus emblica L.(PE)叶提取物对慢性应激大鼠睾丸损伤和相关蛋白标志物变化的影响.
方法:将成年雄性大鼠分成四组:对照组、慢性应激(CS)组和两组PE提取物治疗组(50或100 mg/kg体重(BW)).对各组的精子质量、睾丸和尾附睾的组织学特征、以及血清皮质酮、睾酮和丙二醛(MDA)的水平进行分析比较.并使用免疫印迹分析研究睾丸类固醇合成快速调节蛋白(StAR)和酪氨酸磷酸化蛋白的表达.
结论:结果显示,50 mg/kg BW的PE能显着增加精子浓度和睾酮水平,同时降低CS大鼠中皮质酮水平、MDA水平、以及精子头异常和顶体反应精子的比例.此外,两种剂量的PE都能缓解CS大鼠的睾丸组织病理学特征.同时我们还发现, 50 mg/kg BW的PE可以显著提高StAR蛋白的表达,并改变睾丸中部分酪氨酸磷酸化蛋白的强度.总之,50 mg/kg BW的PE叶提取物可以预防CS大鼠的睾丸损伤.

关键词组：Phyllanthus emblica L.叶提取物;慢性应激;睾丸损伤;酪氨酸磷酸化

目的:探讨不同浓度蜂王浆主蛋白(MRJPs)对人胚肺成纤维细胞HFL-I的抗衰老作用,并对其可能的分子机理进行预测.
创新点:本实验采用拉曼光谱法探究添加MRJPs对HFL-I细胞内成分的影响.实验发现添加MRJPs的 HFL-I与对照组的HFL-I的拉曼光谱图中,与DNA和蛋白质合成相关的拉曼峰发生了变化.该发现在未来可作为鉴定衰老HFL-I的一种手段.
方法:实验以蜂王浆为原料,利用透析法得到MRJPs.通过对不同浓度MRJPs处理的HFL-I进行细胞形态学观察,测定HFL-I生命周期以及检测其β-半乳糖苷酶活性,评价了MRJPs的抗衰老效果.并且通过MTT法考察了不同浓度MRJPs对HFL-I的促增殖作用.同时,实验一方面采用实时定量聚合酶链反应(qPCR)测量了不同浓度MRJPs处理的HFL-I的细胞端粒相对长度以及MTOR、SOD1、CTNNB1、TP53四种衰老相关基因的相对表达量;另一方面还通过拉曼光谱实验法,进一步探索了MRJPs抗衰老的分子机理.
结论:本实验结果显示,添加MRJPs能降低HFL-I衰老细胞所占比例,显著延长HFL-I的生命周期,一定量的MRJPs还能够促进HFL-I的增殖.此外,MRJPs还能减缓细胞端粒长度的缩短,上调衰老相关基因SOD1的表达,下调抗衰老基因MTOR、CTNNB1和TP53的表达.通过MRJPs添加组细胞的拉曼光谱上出现的独特的碱基、酰胺羰基和芳香氢峰,推测MRJPs的抗衰老作用可能与促进DNA及蛋白质在细胞中的合成密切相关.

关键词组：蜂王浆主蛋白;人胚肺成纤维细胞;抗衰老;拉曼光谱;端粒长度;分子机理

目的:新生儿早发型无乳链球菌(GBS)是一种可致婴儿脑、肺和眼部发生感染甚至死亡的细菌.筛查其感染风险因素并建立概率预测模型有助于疾病的预防和控制,进一步分析GBS菌株的耐药类型和耐药基因,为疾病的临床诊断和治疗提供指导意见.
创新点:首次归类了新生儿感染GBS的众多因素,按照孕妇、分娩过程、胎儿因素分为三类,统计筛选出重要风险因素并建立Logistic回归的概率预测模型,并通过聚合酶链式反应(PCR)筛查到了相关耐药基因.
方法:收集2007年1月至2015年12月,浙江大学医学院附属妇产科医院、温州医科大学附属眼视光医院和温州市人民医院的实验组135例早发型GBS感染和对照组234例无感染的新生儿及其母亲的临床资料和标本,进行数据统计分析并构建概率预测模型,采用传统的药敏实验对所有GBS阳性标本进行耐药分析,同时PCR筛查耐药基因并测定序列.
结论:这9年间新生儿早发型GBS感染率呈上升趋势.孕妇泌尿系统感染、胎膜早破、胎龄这三项因素与感染GBS的结局存在显著关联,由此得出的Logistic回归模型可用于预测感染GBS的概率.135株GBS对克林霉素、红霉素、四环素的耐药菌株比例分别为51.11%、80.00%、91.11%,同时未发现对万古霉素、青霉素、呋喃妥因、力奈唑胺的耐药性.PCR筛查发现aac6、ant6-I、aph3-III和TEM四个耐药基因,其中aph3-III仅存在于耐药株中,而测序发现aac6基因在非耐药株中相比耐药株存在一个缺失突变.临床上尽早对患者分离的GBS药敏试验,有助于合理用药和有效治疗.

关键词组：新生儿;无乳链球菌;风险因素;耐药性