概要:理解胚胎肢体发育有助于更加全面地了解肢体的发生和分化,同时对于相关基因疗法和肢体再生具有临床指导意义.本文综述了顶端外胚层嵴(AER)参与胚胎肢体发育调控的研究进展及机理,重点总结了AER对肢体发育三个轴向的立体调控,包括基因表达调控、信号通路及相关调控中心,并进一步讨论了各信号中心之间的交互作用及现有研究待解决问题,从而加深对肢体发育异常、肢端异常等疾病的理解.

关键词组：顶端外胚层嵴(AER);肢体发育;成纤维细胞生长因子(FGF);极化活性区(APZ)

概要:RNA解旋酶是参与RNA代谢的最大的蛋白质家族,通过翻译和前体RNA剪接等各种过程来稳定细胞内环境.这些蛋白质还与一些疾病有关,如癌症和病毒性疾病.自噬是一种自我消化和保护细胞的运输过程,通过降解多余的细胞器和细胞垃圾来稳定内部环境或维持细胞的基本生存,与人类疾病有关.与自噬相似,RNA解旋酶在维持细胞内稳态中发挥着重要的作用,与多种疾病相关.近年来的研究表明,RNA解旋酶与自噬密切相关,参与调节自噬或作为自噬与其他细胞活动之间的桥梁,广泛影响了一些病理生理过程.本文总结了最新的研究,以了解RNA解旋酶调节自噬的机制以及这些机制与疾病之间的联系.

关键词组：RNA解旋酶;自噬;内稳态;调节

目的:结肠癌是全球第三大常见癌症,转移是结肠癌患者死亡的主要原因,因此迫切需要寻找能够抑制结肠癌转移新方法.在前期研究中,我们证明了轮枝孢菌素A在各种类型的癌症中均具有强大的抗肿瘤增殖作用.在本研究中,我们试图确定轮枝孢菌素A对结肠癌细胞的抗转移作用,并阐明其潜在的分子机制.
创新点:首次发现轮枝孢菌素A可以有效地抑制结肠癌细胞在体内外的迁移和侵袭.在分子水平上,沉默c-Met显著降低了结肠细胞的侵袭,而轮枝孢菌素A正是有效的c-Met抑制剂;同时,轮枝孢菌素A还可以通过削弱c-MET磷酸化来抑制c-MET下游Ras/Raf/MEK/ERK信号通路,从而达到抗肿瘤转移效果.
方法:采用划痕分析和Transwell法来证明轮枝孢菌素A对结肠癌细胞体外迁移和侵袭的影响;采用蛋白质印迹法来确定c-MET及其下游分子的表达水平和活性;采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)分析以评估c-Met的mRNA表达水平;采用RNA干扰测定用于沉默细胞中c-Met的表达;采用质粒瞬时转染以过度表达Erk.
结论:轮枝孢菌素A显著抑制结肠癌细胞的迁移和侵袭,抑制c-Met转录表达,削弱c-MET磷酸化,从而抑制其下游Ras/Raf/MEK/ERK信号通路,这是轮枝孢菌素A抗结肠癌细胞转移的主要分子机制.根据本研究结果,我们确定天然产物轮枝孢菌素A具有进一步开发抗癌症转移的巨大潜力.

关键词组：轮枝孢菌素A;结肠癌;迁移;侵袭;c-MET

目的:本研究旨在根据种子初始含水量确定水稻种子的最佳干燥温度,并阐明干燥温度和种子初始水分影响水稻种子干燥后种子活力的机制.
创新点:根据不同初始水分的水稻种子,设置了不同梯度的干燥温度,系统地研究了干燥温度和种子初始水分对种子机械干燥过程与种子活力的影响,并得到了不同初始水分的适宜干燥温度.
方法:在不同天气,分别收获初始含水量为20%、25%与30%的水稻种子样品,并分别设置4个温度梯度的干燥温度.采用三九远红外线干燥机(NP-120e)干燥水稻种子,对干燥后的水稻种子进行标准发芽试验,并测定相关生理生化指标,并进行相关性分析.
结论:初始含水量为20%、25%与30%的水稻种子的适宜干燥温度分别为45、42与38 °C.较高的干燥温度显著降低了水稻种子的活力.种子干燥过程与萌发初期水稻种子内部活性氧、抗氧化酶、赤霉素、脱落酸和α-淀粉酶的代谢可能与干燥温度调控水稻种子活力的机制密切相关.

关键词组：干燥温度;水稻;种子活力;赤霉素;脱落酸;抗氧化酶

目的:建立基于单克隆抗体的检测番茄等植物中凤果花叶病毒(PepMV)的血清学方法,为PepMV的田间调查和诊断及其科学防控提供快速实用的检测技术.
创新点:首次制备了抗PepMV的高度特异和灵敏的单克隆抗体,并利用制备的单抗建立了3种能特异且灵敏地检测PepMV的血清学方法.
方法:以差速离心方法提纯的PepMV粒子作为免疫原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术获得了能稳定传代并分泌PepMV单克隆抗体的杂交瘤细胞株;杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔获得单克隆抗体腹水,并以制备单抗为核心,根据血清学原理建立检测植物中PepMV的双抗夹心酶联免疫吸附试验(DAS-ELISA)、斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)和组织印迹酶联免疫吸附试验(Tissue print-ELISA)三种血清学检测方法;利用田间番茄样品分析建立的血清学方法检测PepMV的有效性.
结论:利用杂交瘤技术获得了6株能分泌高度特异灵敏PepMV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,以分泌的单抗为核心建立了检测植株中PepMV的DAS-ELISA、Dot-ELISA和Tissue print-ELISA三种高度灵敏的血清学新技术.三种建立的血清学技术检测感染PepMV的番茄植株均呈强阳性反应,而检测健康番茄及感染其他5种植物病毒的植株呈阴性反应,且DAS-ELISA和Dot-ELISA血清学技术检测番茄病叶粗提液的灵敏度分别达到1:1 310 720和1:20 480倍稀释(质量体积比,g/mL).田间样品检测结果发现,建立的血清学技术的检测结果与反转录聚合酶链反应(RT-PCR)的检测结果一致,表明建立的血清学方法可有效地用于植物中PepMV的检测.同时,本研究首次发现PepMV已在我国云南番茄作物上发生流行.PepMV单克隆抗体的制备及其灵敏血清学检测方法的建立有益于PepMV的田间调查和诊断及其科学防控.

关键词组：凤果花叶病毒;单克隆抗体;血清学方法;双抗夹心酶联免疫吸附试验(DAS-ELISA);斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA);组织印迹酶联免疫吸附试验(Tissue print-ELISA)

目的:确定罗氏沼虾在蜕皮过程(该过程引起同类残杀)中释放的氨基酸组分,并明确其中差异的氨基酸成分.
创新点:了解罗氏沼虾蜕皮过程中生化组分的变化对于理解同类残杀的重要意义.目前,还没有关于同类残杀和蜕皮过程与生化组分之间关系的研究报道.本研究以此为切入点,采用统计学方法探究二者之间的关联,并鉴定其中差异的氨基酸成分.
方法:在人工饲养条件下,测定了蜕皮阶段和非蜕皮阶段的罗氏沼虾肌肉、外骨骼和养殖水体中的总氨基酸及自由氨基酸组分,采用双因素方差分析法比较分析了两个阶段氨基酸组分的差异,同时鉴定了差异的氨基酸成分.
结论:在蜕皮阶段,组织中的总氨基酸以脯氨酸和肌氨酸的含量最高,而水体中的自由氨基酸含量以色氨酸和脯氨酸为主.研究结果表明,这些氨基酸组分在罗氏沼虾蜕皮过程中释放了促进同类残杀的化学信号.

关键词组：氨基酸组分;同类残杀;化学信号;罗氏沼虾;蜕皮

目的:筛选产L(+)-酒石酸的新真菌菌株.
创新点:首次筛选获得能同时在酸性和高底物浓度下转化生产L(+)-酒石酸的菌株.
方法:利用电镜、内转录间隔区(ITS)序列、核磁共振、质谱和旋光度对筛选菌株进行鉴定,并优化其发酵条件,研究其酶学性质.
结论:扩展青霉WH-3的60%活性位于菌丝体中,且该菌丝体能在酸性(pH 4.5)、高浓度底物中转化,具有高转化率和高立体特异性,为L(+)-酒石酸的生产提供新的催化剂.

关键词组：L(+)-酒石酸;扩展青霉;顺式环氧琥珀酸水解酶;筛菌